細(xì)胞MTT實(shí)驗(yàn)

簡(jiǎn)要描述：細(xì)胞MTT實(shí)驗(yàn)：MTT法又稱(chēng)MTT比色法，是一種檢測(cè)細(xì)胞存活和生長(zhǎng)的方法。其檢測(cè)原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲臜（Formazan）并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無(wú)此功能。

更新時(shí)間：2022-12-23
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實(shí)驗(yàn)

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詳細(xì)介紹

MTT法是一種檢測(cè)細(xì)胞存活和生長(zhǎng)的方法。MTT為黃色化合物,是一種接受氫離子的染料,可作用于活細(xì)胞線粒體中的呼吸鏈,在琥珀酸脫氫酶和細(xì)胞色素C的作用下,外源性MT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚( Formazan)并沉積在細(xì)胞中,而死細(xì)胞無(wú)此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細(xì)胞中的甲瓚,用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在570nm(參比波長(zhǎng)630m)波長(zhǎng)處測(cè)定其光吸收值,可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi),MT結(jié)晶形成的量與活細(xì)胞數(shù)成正比。

注意事項(xiàng)：
MTT法只能用來(lái)檢測(cè)細(xì)胞相對(duì)數(shù)和相對(duì)活力。在用酶標(biāo)儀檢測(cè)結(jié)果的時(shí)候，為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的線性，MTT 吸光度在0-0.7 范圍內(nèi)。
MTT一般現(xiàn)用現(xiàn)配，過(guò)濾后4℃避光保存兩周內(nèi)有效，或配制成5mg/ml保存在-20℃長(zhǎng)期保存，避免反復(fù)凍融，小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光以免分解。
MTT有致癌性，用的時(shí)候注意防護(hù)，配成的MTT需要無(wú)菌。
配制MTT時(shí)用PBS溶解,也有人用生理鹽水配，60℃水浴助溶。

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